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              BD培養基的配制講訴

              更新時間:2014-12-29  |  點擊率:2823


                 BD培養基(Medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養基還含有抗菌素和色素,用于單種微生物培養和鑒定。


              BD培養基的配制

                1.配料

                配方換算→在容器中加入少量水〔蒸餾水,自然水〕→按照配方稱取各種藥品〔依次加入〕→加足所需水量《一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋》。

                2.溶解

                淀粉溶解:少量冷水調成糊狀加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

                3.調PH

                用1N的鹽酸或的1N NaOH把培養基調節到所要求的值。

                4.過濾

                濾紙或棉花進行過濾。

                5.分裝

                一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

                (1)三角瓶

                若作靜置培養,則100 ml培養基/250 ml的三角瓶,zui多不能超過150 ml培養基/250 ml的三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15~20 ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。

                (2)試管分裝

                液體培養基一般裝4~5 ml,約試管的1/4高度;

                固體斜面培養基一般裝3~4 ml,約試管的1/5高度。

                6.包扎

                分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

                7.滅菌

                按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。

                8.擺斜面

                滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。

                9.貯存

                培養基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

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